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54、设计PCR引物时候,需要考虑引物的Tm值范围,一般Tm值在60摄氏度较好。
参考答案和解析
B
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考题
影响Tm值的因素有()
A.核酸分子长短与Tm值大小成正比B.DNA分子中G、C对含量高,则Tm值增高C.溶液离子强度低,则Tm值增高D.DNA中A、T对含量高,则Tm值增高E.DNA的二三级结构要比其一级结构具有的Tm值更高
考题
关于引物,叙述错误的是A、引物的长度为18~25 bpB、引物内部不能存在连续的互补序列,防止产生二聚体和发夹结构C、引物中G+C的含量占45%~55%D、引物的3′ 端可以带有生物素、荧光素或酶切位点E、两条引物的Tm值应该尽量相近
考题
下列关于Tm值的叙述,错误的是()
A.DNA变性从解链开始到解链完成,紫外光吸收值达到最大时的温度B.G含量越高,Tm值越大C.C含量越高,Tm值越大D.核酸分子越大,Tm值越大E.T含量对Tm值影响较小
考题
引物的退火温度与解链温度(Tm)的关系通常是( )。A、退火温度比Tm高5℃~10℃B、退火温度比Tm低5℃~10℃C、退火温度比Tm低10℃~15℃D、退火温度比Tm高15℃~20℃E、退火温度比Tm低15℃~20℃
考题
下面关于PCR的说法哪些是错误的
A. PCR的5'端和3'端引物需要结合在模板的同一条单链上
B.退火温度的确定与Tm值无关
C.用于PCR反应的引物越长越好
D. PCR是获得目的基因的唯一方法
考题
有关一个DNA分子的Tm值,下列哪种说法正确
A. G+C比例越高,Tm值也越高
B. A +T比例越高,Tm值也越高
C. Tm值越高,DNA越易水解
D. Tm值越高,DNA越易发生变性
考题
关于重组PCR定点突变和大引物突变法的叙述正确的是()A、只能在DNA片段的特定部位产生突变B、不需要测序确定突变结果C、重组PCR定点突变法需要4种扩增,3轮PCR反应D、大引物法需要3种扩增引物,3轮PCR反应E、重组PCR定点突变法操作较大引物法简单
考题
单选题下列关于Tm值的叙述,错误的是()A
DNA变性从解链开始到解链完成,紫外光吸收值达到最大时的温度B
G含量越高,Tm值越大C
C含量越高,Tm值越大D
核酸分子越大,Tm值越大E
T含量对Tm值影响较小
考题
单选题关于引物,叙述错误的是()A
引物的长度为18~25bpB
引物内部不能存在连续的互补序列,防止产生二聚体和发夹结构C
引物中G+C的含量占45%~55%D
引物的3′端可以带有生物素、荧光素或酶切位点E
两条引物的Tm值应该尽量相近
考题
单选题关于重组PCR定点突变和大引物突变法的叙述正确的是()A
只能在DNA片段的特定部位产生突变B
不需要测序确定突变结果C
重组PCR定点突变法需要4种扩增,3轮PCR反应D
大引物法需要3种扩增引物,3轮PCR反应E
重组PCR定点突变法操作较大引物法简单
考题
填空题Tm值是DNA的(),如果DNA是不均一的,其Tm值范围增宽,如果DNA是均一的其Tm值范围变窄。
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