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14、下列关于定量PCR引物设计的原则中，不正确的是
A．两条引物的Tm值相差尽量大
B．尽量避免引物二聚体的出现
C．反应体系中引物的浓度一般在0.1~0.2μmol/L之间
D．引物过长可能提高退火温度
参考答案和解析
C
更多 “14、下列关于定量PCR引物设计的原则中，不正确的是A．两条引物的Tm值相差尽量大B．尽量避免引物二聚体的出现C．反应体系中引物的浓度一般在0.1~0.2μmol/L之间D．引物过长可能提高退火温度” 相关考题
考题
关于聚合酶链反应(PCR)的叙述不正确的是( )。A、PCR方法需要特定的引物B、PCR技术是一种体外DNA扩增技术C、PCR方法进行的基因扩增过程类似于体内DNA的复制D、PCR技术能够快速特异地扩增任何目的基因或DNAE、PCR技术需要在恒温环境进行
考题
关于PCR技术的扩展，下列叙述错误的是A、多重PCR是在一次反应中加入多种引物，同时扩增一份DNA样品中的不同序列B、筑巢法PCR可以大大提高PCR的效率，但PCR特异性降低C、利用反向PCR，可以扩增已知序列区间以外的序列D、利用不对称PCR，可以获得大量单链DNAE、共享引物PCR是利用3条引物来扩增两种不同的DNA序列，这种PCR常用于细菌学鉴定，确定同一种细菌的不同种类
考题
PCR是在引物、模板和4种脱氧核糖核苷酸存在的条件下依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应。其中引物是按照与扩增区段两端序列彼此互补的原则设计的，因此每一条新生链的合成都是从引物的退火结合位点开始，并沿着相反链延伸合成的。PCR反应的特异性由下列哪一个因素决定？( )A、模板B、引物C、dNTPD、镁离子E、退火温度
考题
关于PCR引物设计的原理，下列叙述正确的是A、待扩增片段的序列是已知的，在片段两侧确定引物顺序B、引物长度一般为15～30个核苷酸，但也可多至50个左右C、引物中的碱基应随机分布，G＋C的含量宜在45%～55%D、引物内部不应形成二级结构，避免在链内存在互补的序列E、可以在引物的3′末端引入特定的酶切位点
考题
关于定量PCR，错误的是A、可以定量或半定量检测PCR产物的方法B、定量PCR主要进行基因表达的分析和病原体的核酸检测C、水解探针技术中TaqMan探针的位置位于两条引物之间D、分子信标在自由状态下为发夹结构，荧光信号极低E、定量PCR在封闭状态下进行，有效避免了产物的实验室污染
考题
以下关于PCR的说法错误的是（）A、PCR反应必须要有模板、引物、dNTP和DNA聚合酶B、应用PCR技术可以进行定点突变C、PCR的引物必须完全和模板互补配对D、PCR反应中，仅介于两引物间的DNA片段得到大量扩增
考题
聚合酶链式反应（PCR）是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般经历下述30多次循环：95℃下使模板DNA变性、解链→55℃下复性（引物与DNA模板链结合）→72℃下引物链延伸（形成新的脱氧核苷酸链）。下列有关PCR过程的叙述中不正确的是（）A、变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键B、复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成C、延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸D、PCR与细胞内DNA复制相比所需酶的最适温度较高
考题
关于重组PCR定点突变和大引物突变法的叙述正确的是（）A、只能在DNA片段的特定部位产生突变B、不需要测序确定突变结果C、重组PCR定点突变法需要4种扩增，3轮PCR反应D、大引物法需要3种扩增引物，3轮PCR反应E、重组PCR定点突变法操作较大引物法简单
考题
单选题荧光定量PCR检测因为具有自动化程度高、易于标准化、产物闭管检测减少污染、定量报告检测结果等诸多优点，现在临床检验中应用越来越广泛，它与常规PCR相比在很多方面都有其特点。荧光定量PCR方法中不是基于FRET原理设计的是（）A
双链DNA染料结合法B
水解探针法C
分子信标法D
杂交探针法E
荧光标记引物法
考题
单选题下列关于PCR的叙述哪一个是不正确的？ （）A
是Mullis于1984年发明的一种体外扩增DNA的技术B
根据DNA复制的基本原则，反应体系中需加入RNA聚合酶以合成引物C
在PCR反应体系中，需要特定的引物、dNTP、镁离子等D
需要模板DNA即扩增的DNA片段
考题
单选题关于重组PCR定点突变和大引物突变法的叙述正确的是（）A
只能在DNA片段的特定部位产生突变B
不需要测序确定突变结果C
重组PCR定点突变法需要4种扩增，3轮PCR反应D
大引物法需要3种扩增引物，3轮PCR反应E
重组PCR定点突变法操作较大引物法简单
考题
单选题关于定量PCR，错误的是（）A
可以定量或半定量检测PCR产物的方法B
定量PCR主要进行基因表达的分析和病原体的核酸检测C
水解探针技术中TaqMan探针的位置位于两条引物之间D
分子信标在自由状态下为发夹结构，荧光信号极低E
定量PCR在封闭状态下进行，有效避免了产物的实验室污染
考题
问答题PCR引物设计的原则主要有哪些？
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