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蓝-白斑筛选中,质粒的基本条件必须满足上含有------和 -------。
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考题
某一质粒载体如图6所示,外源DNA插入到Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活
(Ampr表示氨苄青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因)。有人将此质粒载体用BamH I酶切后,与用BamH I酶切获得的目的基因混合,加入DNA连接酶进行连接反应,用得到的混合物直接转化大肠杆菌。结果大肠杆菌有的未被转化,有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种,分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题:
(1)质粒载体作为基因工程的工具,应具备的基本条件有____(答出两点即可)。而作为基因表达载体,除满足上述基本条件外,还需具有启动子和终止子。
(2)如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选,在上述三种大肠杆菌细胞中,未被转化的和仅含有环状目的基因的细胞是不能区分的,其原因是____;并且含有质粒载体和含有插入了目的基因的重组质粒的细胞也是不能区分的,其原因是____。在上述筛选的基础上,若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落,还需使用含有____的固体培养基。
(3)基因工程中,某些噬菌体经改造后可以作为载体,其DNA复制所需的原料来自____。
考题
含有突变的乳糖操纵子被克隆到一质粒中,然后将这种质粒转化到含有野生型乳糖操纵子的细菌中,结果发现细菌染色体上的乳糖操纵子不再受乳糖的诱导。试问: (1)质粒操纵子中什么样的突变会产生以上的结果? (2)假定质粒转化的结果导致质粒上三个与乳糖代谢有关的酶呈高水平的组成型表达,则含有什么样突变的质粒能产生这种结果?
考题
单选题关于蓝白斑筛选,叙述错误的是()A
又称α-互补筛选B
含有重组质粒的细菌形成白色菌落C
含有重组质粒的细菌形成蓝色菌落D
带有“空”质粒的细菌形成蓝色菌落E
不含质粒的细菌不能生长
考题
单选题在进行蓝-白筛选时,pUC载体的lacZ基因位点插入外源DNA,转化细菌后,含有插入了外源DNA的重组质粒的()。A
细菌不能在含氨苄青霉素的培养板上生长B
细菌在含有X-gal和诱导剂IPTG的琼脂培养板上形成白色菌斑C
细菌在含有X-gal和诱导剂IPTG的琼脂培养板上形成蓝色菌斑D
细菌在含有X-gal和诱导剂IPTG的琼脂培养板上形成透明的无色菌斑E
无菌落形成
考题
填空题绘制流网时必须满足的基本条件之一是流线和等势线必须()。
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