单选题

下列不是HLA抗体检测方法的是（　　）。

A 补体依赖细胞毒实验（CDC）

B 酶联免疫法（ELISA）

C 流式细胞仪法（flow cytometry）

D 单抗原磁珠法（1uminex TM flowCytometry）

E 酶联免疫斑点检测（enzyme-linkedimmunospot assay，ELISPOT）

解析： 补体依赖细胞毒实验又称微量淋巴细胞毒实验，是由美国洛杉矶加州大学的Paul Terasaki教授于1964年创建，主要原理是淋巴细胞具有HLA抗原，HLA抗体能结合到带有相应抗原的淋巴细胞膜上，补体可以结合并在淋巴细胞膜上使其死亡。如果淋巴细胞不带有相应的抗原，则无此作用。通过染色来观察细胞是否死亡来确定相应的抗原或抗体，酶联免疫法的基本原理是将HLA抗原包被在一个孔内，将患者血清加入孔中与孔内的HLA抗原反应，通过酶作用使其显色，用荧光仪根据吸收光的不同来判断结果，流式细胞仪法及单抗原磁珠法的基本原理都是将HLA单价抗原包被在不同颜色的微磁珠表面，用被检测血清与磁珠反应，血清中HLA特异性抗体便与包被在磁珠上的抗原结合，然后再与标记PE的二抗孵育。根据荧光强弱通过流式细胞仪检测出与这些磁珠对应的HLA抗体，单抗原磁珠法在普通流式细胞仪基础上进一步改进，并通过分析软件的更新，对于较弱的反应抗体也能准确检出。ELISPOT结合了细胞培养技术与酶联免疫吸附技术（即ELISA技术），能够在单细胞水平检测细胞因子的分泌情况。其技术原理就是用抗体捕获培养中的细胞分泌的细胞因子，并以酶联斑点显色的方式将其表现出来。