网友您好， 请在下方输入框内输入要搜索的题目：
题目内容
（请给出正确答案）
细胞复苏时要注意什么？
参考答案和解析
细胞冻存要点
（1）冷冻过程要缓慢.需要冷冻保存的细胞先在4℃冰箱中放置30-60分钟；然后转入-20℃，放置30分钟；然后再转入-80℃放置16-18小时（或过夜）；最后放入液氮中长期保存.有条件的地方，可用程控降温仪，按每分钟-1到-3℃速度降温，一直到-80℃以下，然后直接放入液氮中长期保存.
（2）冻存细胞必须处在对数生长期，活力大于90%，无微生物污染.
（3）细胞浓度控制在：1×107-5×107/ml.
（4）使用高浓度血清或蛋白保护剂.一般情况下，用于冷冻保存完全细胞生长培养液中血清浓度大于20%.
（5）使用合适的细胞冷冻保护剂，以保护细胞在冷冻过程中免受冰晶破坏.目前，最常用的冷冻保护剂是DMSO（二甲基亚砜），使用终浓度为5-10%.但是，有些细胞系不能用DMSO作为冷冻保护剂，如人白血病细胞系HL-60.因为，DMSO能诱导HL-60细胞分化.在这种情况下，可选用其它冷冻保护剂，如甘油（glycele），羟乙基淀粉等.
注意事项
（1）细胞在冷冻过程中在-20℃冰箱内放置时间不可超过1小时，以防止冰晶过大而破坏细胞.也可跳过-20℃这一步骤直接放入-80℃冰箱中，但这样做细胞存活率要低一些.
（2）DMSO稀释时会释放大量热量.因此，DMSO不能直接加到细胞液中，必须事先配制.
（3）DMSO必须是细胞培养级别的.新买的DMSO本身处于无菌状态，第一次开瓶后应立即少量分装于无菌试管或瓶中，4℃保存.避免反复冻融造成DMSO裂解产生有害物质.并可减少污染机会.如要过滤DMSO，必须选用耐DMSO的尼龙滤膜.细胞冷冻保存液主要成分：冷冻保护剂，基础培养液，血清或蛋白.
更多 “细胞复苏时要注意什么？” 相关考题
考题
填空题为心跳骤停患者进行复苏时要注意按压（）与（）（或频率），尽量减少中断。
热门标签
最新试卷
