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名词解释题
连接反应

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考题 某一质粒载体如图6所示,外源DNA插入到Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活 (Ampr表示氨苄青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因)。有人将此质粒载体用BamH I酶切后,与用BamH I酶切获得的目的基因混合,加入DNA连接酶进行连接反应,用得到的混合物直接转化大肠杆菌。结果大肠杆菌有的未被转化,有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种,分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题: (1)质粒载体作为基因工程的工具,应具备的基本条件有____(答出两点即可)。而作为基因表达载体,除满足上述基本条件外,还需具有启动子和终止子。 (2)如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选,在上述三种大肠杆菌细胞中,未被转化的和仅含有环状目的基因的细胞是不能区分的,其原因是____;并且含有质粒载体和含有插入了目的基因的重组质粒的细胞也是不能区分的,其原因是____。在上述筛选的基础上,若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落,还需使用含有____的固体培养基。 (3)基因工程中,某些噬菌体经改造后可以作为载体,其DNA复制所需的原料来自____。

考题 DNA连接反应中的注意事项。

考题 下列哪些因素对保证较高连接效率是有利的()A、高纯度DNA。B、载体与目的基因摩尔数之比为1:1。C、载体与目的基因摩尔数之比为1:3~5。D、连接反应体系中DNA浓度较高。E、连接反应体系中DNA浓度较低。

考题 常用的DNA连接酶有两种,即()和(),它们可催化带()匹配的双链DNA分子之间的连接反应

考题 连接反应

考题 下列有关连接反应的叙述,错误的是()A、连接反应的最佳温度为37℃B、连接反应缓冲体系的甘油浓度应低于10%C、连接反应缓冲体系的ATP浓度不能高于1mMD、连接酶通常应过量2-5倍

考题 影响DNA连接酶催化连接反应的因素有哪些?

考题 限制酶切割后的产物连接反应效果差,可能原因是()A、限制酶去除不完全B、平端连接C、核酸外切酶污染D、连接反应温度低于16℃E、从限制酶消化中带来太高浓度的磷酸盐或其他盐类

考题 双脱氧末端终止法测定DNA序列是基于()A、DNA的聚合反应B、DNA的连接反应C、DNA的降解反应D、特殊的DNA连接酶E、聚合单体2’和5’位的脱氧

考题 提高重组率的方法包括(I加大外源DNA与载体的分子之比II载体分子除磷III连接酶过量IV延长连接反应时间)()A、I+IIB、I+II+IIIC、I+III+IVD、II+III+IV

考题 一段转化炉辐射段上方猪尾管的主要作用是()。A、连接反应管与上集气管B、连接反应管与下集气管C、延长反应物的停留时间D、补尝炉管的热膨涨

考题 DNA连接酶催化的连接反应需要能量,大肠杆菌的能量来源是(),动物细胞则以()为能源。

考题 DNA复制时,复制叉进行的半保留复制实际上是半不连续复制,()链上是连续复制,()链上是不连续合成的,即先合成出小的DNA片段,称为冈畸片段,然后再在酶的催化下将这些小的片段连接成长链。连接反应需要能量,细菌内以()为能量来源,动物细胞和某些噬菌体以()为能量来源。

考题 下列有关组合化学的说法不正确的是()A、组合化学方法可以快速合成数量巨大的化合物B、人们已将计算机辅助设计和组合化学合成相结合来设计先导化合物C、利用组合化学合成技术缩短了药物发现的周期D、组合化学以不同的化合物构件单元为组合,连接反应为特征得到了大量的化学实体E、以上都不正确

考题 下列关于大肠杆菌DNA连接酶的叙述中,正确的是()。A、需NADP+参与B、连接反应不需要消耗能量C、需NAD+参与D、需ATP供能E、具有5′→3′聚合活性

考题 问答题DNA连接反应中的注意事项。

考题 单选题下列关于大肠杆菌DNA连接酶的叙述中,正确的是()。A 需NADP+参与B 连接反应不需要消耗能量C 需NAD+参与D 需ATP供能E 具有5′→3′聚合活性

考题 问答题连接反应的一般原则是什么?

考题 单选题下列有关组合化学的说法不正确的是()A 组合化学方法可以快速合成数量巨大的化合物B 人们已将计算机辅助设计和组合化学合成相结合来设计先导化合物C 利用组合化学合成技术缩短了药物发现的周期D 组合化学以不同的化合物构件单元为组合,连接反应为特征得到了大量的化学实体E 以上都不正确

考题 单选题关于DNA复制中连接酶的叙述错误的是()A 参与随从链的生成B 连接双链中的单链缺口C 催化相邻的DNA片段以3′,5′-磷酸二酯键相连D 连接反应需要ATP参与E 催化相邻的DNA片段以5′,3′-磷酸二酯键相连

考题 填空题DNA连接酶催化的连接反应需要能量,大肠杆菌的能量来源是(),动物细胞则以()为能源。

考题 单选题一段转化炉辐射段上方猪尾管的主要作用是()。A 连接反应管与上集气管B 连接反应管与下集气管C 延长反应物的停留时间D 补尝炉管的热膨涨

考题 填空题常用的DNA连接酶有两种,即()和(),它们可催化带()匹配的双链DNA分子之间的连接反应

考题 填空题平末端连接法(bluntendligation)的连接效率比黏性末端连接的效率低得多,所以通常在连接反应体系中适量添加促进大分子凝聚的凝聚剂,以提高平末端DNA连接的效率。常用的凝聚剂是()。

考题 问答题影响DNA连接酶催化连接反应的因素有哪些?

考题 单选题下列有关连接反应的叙述,错误的是()。A 连接反应的最佳温度为37℃B 连接反应缓冲体系的甘油浓度应低于10%C 连接反应缓冲体系的ATP浓度不能高于1mMD 接酶通常应过量2-5倍

考题 填空题DNA复制时,复制叉进行的半保留复制实际上是半不连续复制,()链上是连续复制,()链上是不连续合成的,即先合成出小的DNA片段,称为冈畸片段,然后再在酶的催化下将这些小的片段连接成长链。连接反应需要能量,细菌内以()为能量来源,动物细胞和某些噬菌体以()为能量来源。