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外源基因在大肠杆菌的高效表达受以下条件的影响，包括启动子、终止子、核糖体结合位点、密码子以及质粒拷贝数 。
参考答案和解析
可溶性蛋白、 不可溶性蛋白
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考题
某一质粒载体如图6所示，外源DNA插入到Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活
(Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因)。有人将此质粒载体用BamH I酶切后,与用BamH I酶切获得的目的基因混合，加入DNA连接酶进行连接反应，用得到的混合物直接转化大肠杆菌。结果大肠杆菌有的未被转化，有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种，分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题：
(1)质粒载体作为基因工程的工具，应具备的基本条件有____(答出两点即可)。而作为基因表达载体，除满足上述基本条件外，还需具有启动子和终止子。
(2)如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选，在上述三种大肠杆菌细胞中，未被转化的和仅含有环状目的基因的细胞是不能区分的，其原因是____；并且含有质粒载体和含有插入了目的基因的重组质粒的细胞也是不能区分的，其原因是____。在上述筛选的基础上，若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落，还需使用含有____的固体培养基。
(3)基因工程中，某些噬菌体经改造后可以作为载体，其DNA复制所需的原料来自____。
考题
提高外源基因在大肠杆菌中表达水平的措施有（）。A、调整SD序列与ATG之间的距离B、用点突变的方法改变起始密码子下游的几个密码子C、增加mRNA的稳定性D、使细菌的生长与外源基因的表达分开E、提高表达蛋白的稳定性
考题
在翻译过程中．mRNA必需首先与核糖体相结合才能进行蛋白质合成。在原核生物中，mRNA分子上有两个核糖体结合位点，一个是起始密码AUG，另一个是（）A、启动子B、调节基因C、SD序列D、终止子
考题
采用核糖体表面展示技术，由于（），可以形成目的蛋白-核糖体m-RNA三聚体展示在核糖体表面。A、目的蛋白基因在体外进行转录和翻译B、核糖体表面有目的蛋白的结合位点C、转录得到的mRNA的3’末端缺失终止密码子D、核糖体可以识别mRNA和目的蛋白
考题
单选题密码子反密码子间的相互作用构成了翻译准确度的一个薄弱点，在体内它受以下因素控制（）。A
tRNA与A位点结合时，对大亚基蛋白质的选择性B
核糖体依赖于密码子侧翼序列产生的不同前进速度C
延伸因子与糖体A、P位点相互作用的特异性D
tRNA与A位点结合时，对小亚基蛋白质的选择性E
释放因子与tRNA的竞争
考题
多选题提高外源基因在大肠杆菌中表达水平的措施有（）。A调整SD序列与ATG之间的距离B用点突变的方法改变起始密码子下游的几个密码子C增加mRNA的稳定性D使细菌的生长与外源基因的表达分开E提高表达蛋白的稳定性
考题
填空题外源基因在原核细胞中表达，常用的启动子有（）、（）、（）、（）、（）和（）。
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