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大肠杆菌含有2000种以上的蛋白质，为了分离它所表达的一个外源基因的产物并保持它的活性，常有很大困难。但为了某种目的，请根据下列要求写出具体的方法。 ⑴利用溶解度差别进行分离。 ⑵利用蛋白质分子大小进行分离。 ⑶根据不同电荷进行分离。 ⑷以制备有该产物的抗体进行分离。 ⑸产物的浓缩。 ⑹纯度的鉴定。
参考答案
更多 “大肠杆菌含有2000种以上的蛋白质，为了分离它所表达的一个外源基因的产物并保持它的活性，常有很大困难。但为了某种目的，请根据下列要求写出具体的方法。 ⑴利用溶解度差别进行分离。 ⑵利用蛋白质分子大小进行分离。 ⑶根据不同电荷进行分离。 ⑷以制备有该产物的抗体进行分离。 ⑸产物的浓缩。 ⑹纯度的鉴定。” 相关考题
考题
克隆质粒载体的基本组成有A.含有可利用宿主细胞复制系统复制起始的区域
B.含有一个或多个抗性基因的表达区域
C.含有用于外源基因的DNA限制性内切酶作用位点
D.含有多克隆位点
E.克隆质粒利用自身的复制酶系统，对外源基因进行扩增
考题
某一质粒载体如图6所示，外源DNA插入到Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活
(Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因)。有人将此质粒载体用BamH I酶切后,与用BamH I酶切获得的目的基因混合，加入DNA连接酶进行连接反应，用得到的混合物直接转化大肠杆菌。结果大肠杆菌有的未被转化，有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种，分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题：
(1)质粒载体作为基因工程的工具，应具备的基本条件有____(答出两点即可)。而作为基因表达载体，除满足上述基本条件外，还需具有启动子和终止子。
(2)如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选，在上述三种大肠杆菌细胞中，未被转化的和仅含有环状目的基因的细胞是不能区分的，其原因是____；并且含有质粒载体和含有插入了目的基因的重组质粒的细胞也是不能区分的，其原因是____。在上述筛选的基础上，若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落，还需使用含有____的固体培养基。
(3)基因工程中，某些噬菌体经改造后可以作为载体，其DNA复制所需的原料来自____。
考题
提高外源基因在大肠杆菌中表达水平的措施有（）。A、调整SD序列与ATG之间的距离B、用点突变的方法改变起始密码子下游的几个密码子C、增加mRNA的稳定性D、使细菌的生长与外源基因的表达分开E、提高表达蛋白的稳定性
考题
外源基因原核表达的优点是（）A、具有蛋白质翻译后加工和修饰系统B、不含毒素，安全C、能将外源基因转录的hnRNA剪切加工成成熟的mRNAD、可表达大量的可溶性蛋白质和活性较高的蛋白质E、培养简便、经济、快速，适合大规模生产
考题
外源基因在大肠杆菌中以融合蛋白的形式表达的优点是（） I融合基因能稳定扩增；II融合蛋白能抗蛋白酶的降解；III表达产物易于亲和层析分离A、IIIB、I+IIC、I+IIID、II+IIIE、I+II+III
考题
单选题外源基因原核表达的优点是（）A
具有蛋白质翻译后加工和修饰系统B
不含毒素，安全C
能将外源基因转录的hnRNA剪切加工成成熟的mRNAD
可表达大量的可溶性蛋白质和活性较高的蛋白质E
培养简便、经济、快速，适合大规模生产
考题
多选题提高外源基因在大肠杆菌中表达水平的措施有（）。A调整SD序列与ATG之间的距离B用点突变的方法改变起始密码子下游的几个密码子C增加mRNA的稳定性D使细菌的生长与外源基因的表达分开E提高表达蛋白的稳定性
考题
单选题下列哪个指标能证明在大肠杆菌中成功表达了外源酶蛋白质：（）A
核酸杂交证明蛋白质表达B
在蓝白筛选中菌落呈现蓝色C
RT-PCR能扩增外源基因D
纯化目的蛋自质具有酶活性
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