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基因组文库构建时,目的基因常用BamH I进行酶切,载体常用Sau3A I进行酶切。
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考题
重组DNA技术大致可以用以下几个字简单概括:分(目的基因的分离)、切(限制性内切酶切割目的基因和载体)、接(目的基因和载体连接)、转(连接产物导入受体细胞)、筛(筛选阳性重组子)。将重组DNA导入大肠埃希菌最常用方法是A、磷酸钙共沉淀法B、脂质体法C、显微注射法D、噬菌体感染E、氯化钙法重组DNA技术中最常用的筛选方法是A、标志补救筛选B、插入表达筛选C、抗性筛选D、限制性内切酶酶切图谱分析E、核酸分子杂交筛选
考题
某一质粒载体如图6所示,外源DNA插入到Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活
(Ampr表示氨苄青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因)。有人将此质粒载体用BamH I酶切后,与用BamH I酶切获得的目的基因混合,加入DNA连接酶进行连接反应,用得到的混合物直接转化大肠杆菌。结果大肠杆菌有的未被转化,有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种,分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题:
(1)质粒载体作为基因工程的工具,应具备的基本条件有____(答出两点即可)。而作为基因表达载体,除满足上述基本条件外,还需具有启动子和终止子。
(2)如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选,在上述三种大肠杆菌细胞中,未被转化的和仅含有环状目的基因的细胞是不能区分的,其原因是____;并且含有质粒载体和含有插入了目的基因的重组质粒的细胞也是不能区分的,其原因是____。在上述筛选的基础上,若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落,还需使用含有____的固体培养基。
(3)基因工程中,某些噬菌体经改造后可以作为载体,其DNA复制所需的原料来自____。
考题
重组DNA技术大致可以用以下几个字简单概括:分(目的基因的分离)、切(限制性内切酶切割目的基因和载体)、接(目的基因和载体连接)、转(连接产物导入受体细胞)、筛(筛选阳性重组子)。重组DNA技术中最常用的筛选方法是()A、标志补救筛选B、插入表达筛选C、抗性筛选D、限制性内切酶酶切图谱分析E、核酸分子杂交筛选
考题
基因工程技术也称为DNA重组技术,其实施必须具备的条件是()A、目的基因限制性内切酶运载体体细胞B、重组DNARNA聚合酶内切酶连接酶C、模板DNA信使RNA质粒受体细胞D、工具酶目的基因运载体受体细胞
考题
基因工程操作常用的酶是:I 内切酶II 连接酶III 末端转移酶IV聚合酶()。A、I + IIB、I + III + IVC、II + III + IVD、I +II + IV + III
考题
问答题在细菌质粒 pBPI的四环素抗性基因 tetR的中间有一个 HindⅡ的切点。用 Hind Ⅲ切割果蝇基因组 DNA,以 pBPl 为载体构建基因组文库。分子杂交证明克隆 15 带有果蝇的目的基因。用 Hind Ⅲ和 EcoRV对克隆 15 进行了酶切分析,电泳结果如图 15.1(用酶切的 pBPl质粒 DNA作对照),旁边标出了片段的大小。
如果用克隆在另一个与pBPl完全不同源载体上的四环素抗性基因作为探针进行Southern印迹杂交,预测上述电泳图会出现什么样的杂交带?
考题
单选题猪伪狂犬病病毒只有一种血清型,但不同的分离株毒力有一定差异。区分强毒株和弱毒株常用的方法是()A
采用限制性内切酶对病毒的基因组进行酶切B
采用DNA聚合酶对病毒的基因组进行酶切C
采用DNA连接酶对病毒的基因组进行酶切D
采用碱性磷酸酶对病毒的基因组进行酶切E
采用逆转录酶对病毒的基因组进行酶切
考题
单选题重组DNA技术大致可以用以下几个字简单概括:分(目的基因的分离)、切(限制性内切酶切割目的基因和载体)、接(目的基因和载体连接)、转(连接产物导入受体细胞)、筛(筛选阳性重组子)。重组DNA技术中最常用的筛选方法是()A
标志补救筛选B
插入表达筛选C
抗性筛选D
限制性内切酶酶切图谱分析E
核酸分子杂交筛选
考题
单选题基因工程操作常用的酶是:I 内切酶II 连接酶III 末端转移酶IV聚合酶()。A
I + IIB
I + III + IVC
II + III + IVD
I +II + IV + III
考题
单选题基因组较大的生物进行基因组测序时最常用的基因组文库载体是()A
质粒载体B
噬菌体载体C
BACD
YACE
黏粒载体
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