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荧光定量PCR结果中样品的Ct值受下列哪些因素的影响（）。

  • A、阈值设定
  • B、模版的起始浓度
  • C、PCR反应的循环数
  • D、引物的扩增效率

参考答案

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考题 荧光定量PCR检测因为具有自动化程度高、易于标准化、产物闭管检测减少污染、定量报告检测结果等诸多优点，现在临床检验中应用越来越广泛，它与常规PCR相比在很多方面都有其特点。荧光定量PCR方法中不是基于FRET原理设计的是A、双链DNA染料结合法B、水解探针法C、分子信标法D、杂交探针法E、荧光标记引物法检测原理利用了Taq酶5′→3′外切酶活性的是A、双链DNA染料结合法B、水解探针法C、分子信标法D、杂交探针法E、荧光标记引物法荧光定量PCR方法中最容易出现假阳性的是A、双链DNA染料结合法B、水解探针法C、分子信标法D、杂交探针法E、荧光标记引物法与常规PCR相比，荧光定量PCR的缺陷是A、定量仅根据指数扩增期B、灵敏性太高C、降低了携带污染D、无法检测扩增子大小E、增加了实验室污染的概率关于外标法荧光定量PCR错误的是A、为了定量准确，外标法标准曲线需要5个点以上，还需设阴性对照和阳性对照B、被检标本与标准品扩增效率之间的不一致会影响定量准确性C、是目前临床实验室应用最广泛的一种方法D、DNA标准品常是含有待测基因的一定浓度的质粒E、对于RNA病原体，标准品通常是一定浓度的RNA
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考题 关于PCR技术的扩展，下列叙述错误的是A、多重PCR是在一次反应中加入多种引物，同时扩增一份DNA样品中的不同序列B、筑巢法PCR可以大大提高PCR的效率，但PCR特异性降低C、利用反向PCR，可以扩增已知序列区间以外的序列D、利用不对称PCR，可以获得大量单链DNAE、共享引物PCR是利用3条引物来扩增两种不同的DNA序列，这种PCR常用于细菌学鉴定，确定同一种细菌的不同种类
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考题 下列关于Ct值的叙述，错误的是A、是扩增曲线与荧光本底基线的交叉点处相应的反应循环数B、可以根据Ct值的大小估计模板的初始量C、Ct值大小与模板量呈正比，Ct值越大，模板量越多D、是定量PCR外参照系统中重要的参数E、Ct值大小与模板量呈反比，Ct值越小，模板量越多
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考题 在荧光定量PCR中，对结果的判定的主要依据是______曲线。（）A、标准B、一步C、扩增D、溶解
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考题 以下关于PCR的说法错误的是（）A、PCR反应必须要有模板、引物、dNTP和DNA聚合酶B、应用PCR技术可以进行定点突变C、PCR的引物必须完全和模板互补配对D、PCR反应中，仅介于两引物间的DNA片段得到大量扩增
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考题 探针法荧光定量PCR的阈值线应该画在扩增曲线上的指数期且样品重复性最好的位置。（）
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考题 实时荧光定量PCR引物的扩增效率正常情况应该高于90%。（）
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考题 以下是经过PCR扩增后得到的Ct值，哪个样品的模版原始拷贝数最多（）。A、Ct=20B、Ct=22C、Ct=24D、Ct=26
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考题 引物二聚体的产生会影响染料法荧光定量PCR结果检测的特异性。（）
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考题 实时荧光定量PCR的优点包括（）。A、实时监控PCR反应的进程B、特异性高于普通PCRC、灵敏度高D、在单管中实现扩增和检测分析
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考题 荧光定量PCR结果中样品的Ct值受下列哪些因素的影响（）。A、阈值设定B、模版的起始浓度C、PCR反应的循环数D、引物的扩增效率
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考题 在PCR反应中，整个核酸模版被扩增。（）
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考题 在定量PCR中，对原始模板准确定量的影响因素中，最大的是（）A、原始模板的量B、扩增效率C、循环次数D、扩增产物的量E、循环阈值
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考题 实时定量PCR反应中，各模板的Ct值与模板的起始拷贝数的对数不存在线性关系。
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考题 实时荧光定量PCR检测HCV-RNA，室间质评的5个样本定量结果均低于靶值。根据上述信息，当前首要考虑的原因是（）A、样品的保存和处理B、PCR扩增条件C、试剂的效期D、交叉污染E、实验室环境
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考题 实时定量PCR反应中，每个模板的Ct值与该模板的起始拷贝数的对数存在线性关系，起始拷贝数越多，Ct值越小。
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考题 关于关于重组PCR定点突变法叙述正确的是（）A、增加镁离子浓度容易产生正向突变B、第一轮PCR扩增的是不同DNA模版链C、第二轮PCR扩增的是同一DNA模板链D、第三轮PCR需要两种外侧寡核苷酸引物进行扩增E、该方法产生的DNA片段需要经过测序来验证是否发生其他突变
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考题 在下列哪种PCR仪扩增样品可以了解样品中DNA原始拷贝数（）。A、普通PCR仪B、梯度PCR仪C、原位PCR仪D、荧光实时PCR仪E、定性PCR仪
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考题 关于重组PCR定点突变和大引物突变法的叙述正确的是（）A、只能在DNA片段的特定部位产生突变B、不需要测序确定突变结果C、重组PCR定点突变法需要4种扩增，3轮PCR反应D、大引物法需要3种扩增引物，3轮PCR反应E、重组PCR定点突变法操作较大引物法简单
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考题 关于重组PCR定点突变法叙述正确的是（）A、第一轮PCR扩增的是同一条DNA模版链B、第二轮PCR扩增的不是同一条DNA模板链C、需要RNA作为引物D、一定要使用TaqDNA高保真酶进行扩增E、最后一轮PCR不需引物即可进行扩增
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考题 单选题在下列哪种PCR仪扩增样品可以了解样品中DNA原始拷贝数（）。A 普通PCR仪B 梯度PCR仪C 原位PCR仪D 荧光实时PCR仪E 定性PCR仪
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考题 判断题实时定量PCR反应中，各模板的Ct值与模板的起始拷贝数的对数不存在线性关系。A 对B 错
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考题 判断题实时定量PCR反应中，每个模板的Ct值与该模板的起始拷贝数的对数存在线性关系，起始拷贝数越多，Ct值越小。A 对B 错
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考题 单选题关于重组PCR定点突变和大引物突变法的叙述正确的是（）A 只能在DNA片段的特定部位产生突变B 不需要测序确定突变结果C 重组PCR定点突变法需要4种扩增，3轮PCR反应D 大引物法需要3种扩增引物，3轮PCR反应E 重组PCR定点突变法操作较大引物法简单
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考题 多选题关于关于重组PCR定点突变法叙述正确的是（）A增加镁离子浓度容易产生正向突变B第一轮PCR扩增的是不同DNA模版链C第二轮PCR扩增的是同一DNA模板链D第三轮PCR需要两种外侧寡核苷酸引物进行扩增E该方法产生的DNA片段需要经过测序来验证是否发生其他突变
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考题 单选题在定量PCR中，对原始模板准确定量的影响因素中，最大的是（）A 原始模板的量B 扩增效率C 循环次数D 扩增产物的量E 循环阈值
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考题 单选题下列关于Ct值的叙述，错误的是（）A 是扩增曲线与荧光本底基线的交叉点处相应的反应循环数B 可以根据Ct值的大小估计模板的初始量C Ct值大小与模板量呈正比，Ct值越大，模板量越多D 是定量PCR外参照系统中重要的参数E Ct值大小与模板量呈反比，Ct值越小，模板量越多
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